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AvantorACE色譜柱的差異分離度、選擇性、柱效和保留因子??影響分離度的參數(shù):柱效(N)、保留因子(k)和選擇性(α)??選擇性是對分離度影響最大的因素??在反相色譜中,不同類型的鍵合相將提供其中一種或多種相互作用機制,包括疏水相互作...
獨立測試顯示ACEHPLC色譜柱可產(chǎn)生優(yōu)異的峰形主流5μmC18色譜柱的比較色譜柱尺寸:150x4.6mm,5μm-流動相:80:20MeOH/5mM磷酸二氫鉀緩沖液(pH7.0)-流速:2.0ml/min-溫度:24℃以上數(shù)據(jù)源自美國國家標準與技術(shù)研究所(NIST),2002年9月標準參考物質(zhì)870分析證書-“液相色譜用柱性能測試混合物”?!獢?shù)據(jù)來自美國國家標準與技術(shù)研究所(NIST)。??主流的5μmC18色譜柱品牌??堿性分子測試??峰不對稱性研究“有機堿性化合物(如...
7.1簡介盡管本指南大體上集中在氨基酸分析的初始步驟(重點在水解樣品制備),但本節(jié)還是簡要討論了氨基酸分析中更常用的定量方法。在這些示例中,我們獲得了氨基酸分析結(jié)果;分析中需要計算原始樣品濃度。在這些示例中,我們假設已使用AccQ?Tag或AccQ?Fluor試劑進行了衍生化處理。在進行定量之前:驗證是否已正確鑒別所有峰。如果保留時間不匹配,請檢查校正表中的值。檢查所有峰的積分是否正確。7.2氨基酸的絕對定量7.2.1樣品中蛋白質(zhì)的濃度在某些分析中,分析目標只是測定分析樣品的...
3.1簡介食品和飼料由包含生長和營養(yǎng)所必需氨基酸的化合物組成。分析氨基酸含量對于確保合適的營養(yǎng)非常重要。但是,這些產(chǎn)品是通過批量工藝生產(chǎn)的。與藥物生產(chǎn)一樣,批量工藝在生產(chǎn)運行過程中,產(chǎn)出可能會有所不同。因此,必須考慮代表性樣品的構(gòu)成因素。通常需要采用二次抽樣策略。這些產(chǎn)品的氨基酸分析需要采用多種方法,以便正確分析樣品的總蛋白質(zhì)組成。由于食品和飼料是批量生產(chǎn)的,且其中包含非蛋白質(zhì)成分,因此建議使用液相水解方法。注:含硫氨基酸-半胱氨酸和蛋氨酸,以及色氨酸在標準酸水解中不穩(wěn)定。可...
蛋白質(zhì)和肽”是指從生物反應器或純化過程得到的相對純凈的樣品。這些樣品幾乎或完全不含其他非蛋白質(zhì)物質(zhì)。讓完整蛋白質(zhì)或肽生成游離氨基酸,是獲取有用且準確的氨基酸分析數(shù)據(jù)的關鍵步驟。要生成游離氨基酸,必須將蛋白質(zhì)/肽分解或水解為單個氨基酸組分。本節(jié)介紹了氣相及液相蛋白質(zhì)和肽水解的基本步驟,著重介紹實現(xiàn)出色分析應考慮的基本要點。附加的子小節(jié)介紹了其他可選的水解方法,采用這些方法可分析含標準鹽酸水解技術(shù)無法水解的氨基酸(色氨酸和半胱氨酸/胱氨酸)的特殊樣品。2.1蛋白質(zhì)的酸水解本節(jié)重點...
1.1水解類型肽和蛋白質(zhì)由通過肽鍵結(jié)合在一起的許多氨基酸組成。這些生物分子繼而構(gòu)成許多不同的樣品,諸如生物治療藥物、食品和飼料。為分析這些生物分子中所包含的氨基酸,使鍵水解以形成游離氨基酸至關重要。但在該過程中,偶聯(lián)氨基酸鍵的不同化學性質(zhì)可能影響氨基酸鍵的裂解效率以及單個氨基酸的回收率。例如,水解過程中氨基酸的回收率會受到特定化學反應、試劑基質(zhì)干擾物和氨基酸本身穩(wěn)定性的影響。鑒于樣品和氨基酸的化學及物理性質(zhì)存在很大差異,多年來已經(jīng)開發(fā)出不同的水解程序。這些程序因反應類型(化學...